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兔抗平滑肌抗體ELISA試劑盒 Rabbit Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA試劑盒
更新時間:2024-08-17;廠商性質:經銷商;覽量:680
兔抗平滑肌抗體ELISA試劑盒
方法二 用于檢測未知抗體的間接法:用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。↓ 加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) ↓ 于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。↓ 其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。編輯本段(三)試劑器材1. 試劑 (1)包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml(2)洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml (3)稀釋液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。(4)終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。(5)底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml 加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml 底物緩沖液(PH5.5)10ml 0.75%H2O2 32μl(7)ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5)1ml 3%H2O2 2μl (8)抗原、抗體和酶標記抗體。(9)正常人血清和陽性對照血清。2.器材:(1)聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。
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