簡(jiǎn)要描述:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過(guò)線粒體內(nèi)膜的過(guò)程中起重要作用。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1130
商品詳情:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶。可逆地催化從酰基輔酶將酰基轉(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸通過(guò)線粒體內(nèi)膜的過(guò)程中起重要作用。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3387 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3387-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測(cè)定原理:
基于肉堿和脂酰輔酶在丙二酰輔酶存在與否的條件下,通過(guò)肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過(guò)其吸收峰值得變化(412nm),來(lái)定量分析CPT-1的活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
信號(hào)素3GELISA試劑盒 SEMA3G免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)素3FELISA試劑盒 SEMA3F免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)素3DELISA試劑盒 SEMA3D免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)素3BELISA試劑盒 SEMA3B免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)淋巴細(xì)胞激活分子家族成員7ELISA試劑盒 SLAMF7免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5BELISA試劑盒 STAT5B免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子5AELISA試劑盒 STAT5A免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2ELISA試劑盒 STAT2免費(fèi)代測(cè)試劑
信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子1ELISA試劑盒 STAT1免費(fèi)代測(cè)試劑
鋅指同源框蛋白4ELISA試劑盒 ZFHX4免費(fèi)代測(cè)試劑
心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白CELISA試劑盒 MYBPC3免費(fèi)代測(cè)試劑
心磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 LCLAT1免費(fèi)代測(cè)試劑
心磷脂合酶ELISA試劑盒 CLS免費(fèi)代測(cè)試劑
心肌型蘭尼定受體2ELISA試劑盒 RYR2免費(fèi)代測(cè)試劑
心肌素ELISA試劑盒 MYOCD免費(fèi)代測(cè)試劑
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測(cè)試盒淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
直鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣
直鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
支鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣
支鏈淀粉比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
α比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣
α比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
β比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣
β比色法檢測(cè)試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣