簡要描述:
酰基轉移酶(AAT)測試盒是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1116
商品詳情:
酰基轉移酶(AAT)測試盒測定意義:
AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3479 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3479-1 | 25管/24樣 | 可見分光光度法 |
YSH3479-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,同時還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412nm吸光度增加速率,來計算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
心肌肌動蛋白α1ELISA試劑盒 ACTC1免費代測試劑
心肌鈣黏蛋白ELISA試劑盒 CDHH免費代測試劑
斜方蛋白1ELISA試劑盒 RHOM1免費代測試劑
小異二聚體伴侶ELISA試劑盒 SHP免費代測試劑
小亞基鈣1ELISA試劑盒 CAPNS1免費代測試劑
小細胞蛋白γELISA試劑盒 PARVγ免費代測試劑
小細胞蛋白βELISA試劑盒 PARVβ免費代測試劑
小細胞蛋白αELISA試劑盒 PARVα免費代測試劑
小腦肽4ELISA試劑盒 CBLN4免費代測試劑
小腦肽3ELISA試劑盒 CBLN3免費代測試劑
小腦肽2ELISA試劑盒 CBLN2免費代測試劑
小腦肽1ELISA試劑盒 CBLN1免費代測試劑
小核糖核蛋白多肽CELISA試劑盒 SNRPC免費代測試劑
小根蛋白ELISA試劑盒 ROLT免費代測試劑
小泛素相關修飾蛋白2ELISA試劑盒 SUMO2免費代測試劑
酰基轉移酶(AAT)測試盒γ/糖化酶比色法檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
γ/糖化酶比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
ADPG焦磷化酶(AGP)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
可溶性淀粉合成酶(SSS)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
結合態淀粉合成酶(GBSS)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣