elisa試劑盒免疫組化染色的標準程序可以用于對果蠅類抗原的定位。一般而言，果蠅類標本染色的成功與否依賴于本章開始和第五章所討論的原則。果蠅類標本免疫染色的復雜性在于其不同發育階段出現不同的保護衣殼，包括以下結構：絨毛膜、卵黃膜和角質層。它們均是特定階段的自身環境保護屏障，在發育和生存中起著重要的作用，就方法而言，去除這些結構有利于抗體的透入，且不應改變所研究的抗原特性。因此，在設計果蠅類標本免疫染色的方案中應該考慮使背景降至zui低的程度，對抗體的選擇尤其關鍵。
elisa試劑盒果蠅類標本免疫染色的方法可以分為兩個步驟。*步為處理標本，包括固定和透化處理組織或整個器官。要求處理條件強烈，以便去除果蠅類的保護衣殼、固定抗原以及有利于抗體透入。固定和透化方法的選擇可依據果蠅類發育的不同階段而定。在形成角質層前的胚胎早期，可用有機溶劑、甲醛和醇類的混合物固定和透化組織，以便抗體易于透入。正常情況下超聲處理可以打開角質層。本章介紹的固定方法包括整個胚胎發育的早期和晚期。來自發育晚期的組織通常先被破碎成碎片，然后按標準的多聚甲醛／去污劑法固定和染色。
果蠅類標本染色的第二步是加入一抗及檢測。一抗的加入及檢測與后續的二抗染色有關，但僅有一點不同的是在zui后染色中取決于所需分辨水平。大多數抗原定位實驗使用酶標記的二級試劑。這種方法靈敏度高，并且不需要共聚焦顯微鏡。如要求更高的分辨率或需在同一樣本中觀察兩種抗原時，則采用熒光染料標記的二抗試劑。由于果蠅類標本較厚，要求使用共聚焦顯微鏡觀察染色結果，且依賴于良好的共聚焦設備。以下分別討論這兩部分技術。
在線客服
